哪位可以提供成功转染raw264.7小鼠巨噬单核细胞步骤及注意事项？

我们以质粒DNA转染raw 264.7小鼠巨噬单核细胞为例请按照下面操作可以保证转染效率在50-90%左右。一、质粒DNA、细胞整备1、质粒DNA浓度500ng-1ug/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素）2、转染细胞不可以有细胞聚团、变形和小黑点二、操作流程操作流程1、先将细胞接种到细胞培养板，细胞汇合度在60%左右，再进行转染。2、复合物制备：将核酸与美国Zeta Life公司Advanced Transfection Reagent转染试剂，货号AD600150转染试剂按照1:1关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟。3、将复合物加入细胞培养板，并轻轻混匀，放入培养箱中继续培养。4、转染24小时后对细胞进行正常换液。5、质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率三、转染试剂、质粒DNA用量a.24孔板转染试剂、质粒DNA用量：2.5ul：2.5ug；b.6孔板转染试剂、质粒DNA用量：10ul：10ug;四、注意事项：1本转染方法不适用所有脂类转染试剂的转染如：Lipo3000、Lipo2000、Hp等；2培养细胞血清:Zeta Life z7181-500胎牛血清